Leica社BOND RX全自動免疫染色装置用の免疫組織化学染色プロトコール

重要：お使いになる製品がLeica社BOND RXで検証され、使用が推奨されているかどうかについては、各製品のデータシート上部にあるAPPLICATIONSのセクション、あるいは 製品ウェブページで確認してください。使用可能な場合は、 各製品専用のプロトコールを参照して実験を実施してください。BOND RX プロトコールで検証されていない場合は、以下の条件から始めることを推奨します。

	手順	試薬	時間/温度
1	Dewax (脱パラフィン)	BOND Dewax Solution、100% アルコール、BOND Wash Solution	BOND RXに設定済みの条件
2	抗原賦活化	BOND Epitope Retrieval ER2 Solution	20分、100°C | プロトコール：ER2でHIER 20分
3	内因性ペルオキシダーゼのブロッキング	Refine Detection Kit Peroxide Block*	5分間
	洗浄	BOND Wash Solution	3x 0:00分
4	タンパク質のブロッキング (オプション)	NGS #5425またはAnimal-Free Blocking Solution #15019	20分間
5	一次抗体	SignalStain® Antibody Diluent #8112で希釈	30分間
	洗浄	BOND Wash Solution	3x 2:00分
NA	マウス用一次抗体リンカーの結合	Refine Detection Kit Post Primary*	ラビット抗体では適用なし、マウス抗体では10分
6	二次検出	Refine Detection Kit Polymer*	10分間
	洗浄	BOND Wash Solution/Deionized Water	カスタム設定 (下記参照)
7a	可視化	Refine Detection Kit Mixed DAB Refine*	0:00分
7b	可視化	Refine Detection Kit Mixed DAB Refine*	10分間
	洗浄	Deionized Water	3x 0:00分
8	対比染色	Refine Detection Kit Hematoxylin*	5分間
	洗浄	Deionized Water	0:00分
	洗浄	BOND Wash Solution	0:00分
	洗浄	Deionized Water	0:00分
9	脱水 (発色後処理)：
	95%エタノールで切片を各10秒間、2回インキュベートしてください。
	100%エタノールで切片を各10秒間、2回インキュベートしてください。
	キシレンで切片を各10秒間ずつ、2回インキュベートしてください。
10	切片をカバースリップとSignalStain® Mounting Medium II #84583で封入してください。
	(オプション) カスタム洗浄：	BOND Wash Solution	2:00
		BOND Wash Solution	ディスペンサータイプ：0:00にオープン
		BOND Wash Solution	2:00
		BOND Wash Solution	ディスペンサータイプ：0:00にオープン
		BOND Wash Solution	0:00
		Deionized Water	0:00

*試薬は BOND Polymer Refine Detection Kit (カタログ番号：DS9800) に含まれています。

Leicaは、Leica Microsystems IR GmbHの登録商標です。

BONDは、Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd.の商標です。CSTと Leica Microsystems IR GmbHまたはLeica Biosystems Melbourne Pty. Ltd.との間に業務提携やスポンサーシップが存在することを示唆するものではありません。